PCR中的DNA聚合酶，你选对了吗？”
CR（聚合酶链式反应）对于常年在实验室里狂奔的实验犬来说并不陌生。那么，您是否选择了正确的 DNA 聚合酶（PCR 反应的核心成分）？
常见的DNA聚合酶如Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29等。根据耐热性可分为耐热酶和室温酶。耐热聚合酶如Taq、Pfu、KOD、Primerstar等，室温聚合酶有Klenow、Bst、Phi29等。按照保真度分，高保真聚合酶Pfu、KOD、Phanta等，常见聚合酶Taq ， ETC。
面对如此多的选择，大多数刚进入实验室的新生都默默地表达着对选择的恐惧和承诺……
因此，解决的办法是根据实验目的选择合适的DNA聚合酶。例如：常规PCR扩增和菌液鉴定，对于长度小于5kb的片段保真度要求不高，可以使用Taq酶进行扩增。使用Mix格式使样品混合更简单，操作更方便。如果混合物含有大量泡沫并且您想消除泡沫，建议您使用 Green Taq Mix。如果想要获得更高的产量，可以选择Taq Plus DNA聚合酶，它比Taq酶具有更强的扩增性能。
1、选择热启动酶，减少非特异性扩增
使用Taq酶进行扩增时，有时会出现非特异性扩增。可能的原因可以从模板、引物、系统、程序一一排查。例如，模板是否被污染、引物的特异性如何、Mg2+浓度是否高等。不可忽视的原因之一是DNA聚合酶的类型是否合适。如果排除其他原因后仍然存在非特定产物，可以选择热启动酶并重新实验，这样可以有效减少或消除系统中其他产物的积累。常用的热启动酶分为两类：一类是化学修饰的热启动酶，如Ace Taq，在95℃预变性后可释放酶活性。°C 5-10分钟；另一种是抗体修饰的热启动酶。例如Champagne Taq可以通过在95℃预变性来释放酶活性°C 30秒。使用时要注意预变性时间，以获得满意的扩增结果。
2. 选择Lamp来放大长片段
如何扩增大于5Kb的长片段？如果您的实验不需要高保真度，则可以使用 LAmp DNA 聚合酶。其保真度是Taq酶的6倍，可以扩增超过20Kb的基因组和cDNA片段。对于低拷贝、低纯度、不同GC含量的模板有较高的成功率。
3. 选择高保真酶，快速高效扩增
如果实验要求高保真度，在选择DNA聚合酶时需要使用高保真酶，如Pfu、KOD、Primerstar、Phanta等。前三种都是第一代高保真酶，已广泛应用于市场。Novozant科研团队经过大力改造生产的Phanta系列高保真酶，保真度是Taq酶的50倍，扩增性能、扩增长度、产量、模板适应性等均得到显着提升。Phanta Max 的保真度是 Taq 酶的 53 倍，Pfu 的 6 倍。质粒等简单模板的有效扩增长度可达40kb，cDNA的有效扩增长度可达10kb，基因组的有效扩增长度可达20kb。适用于各种GC含量的扩增，可用于植物叶片、全血等多种样品的直接PCR，且扩增只需30s/kb，甚至2kb/s。如此出色，让你爱不释手，对吧？
4. 选择直接扩增试剂盒对粗产物进行扩增
xxx生产的各种直接扩增试剂盒直接对粗品进行扩增，大大缩短了实验工作周期。例如，One Step Mouse Genotyping Kit可直接用于小鼠基因分型，Blood Direct PCR Kit V2可直接用于全血扩增。
