选择二抗时应考虑哪些方面？
广义上，二抗是指与一抗发生特异性反应并结合的抗体。在免疫反应中，常常需要选择不同的二抗进行测试。任何目标蛋白的检测都有不止一种抗体可供选择，在后续的实验中也会有不同的检测方案。因此，在选择二抗时，应综合考虑一抗的类型以及后续检测方案的要求。一般来说，选择合适的二抗需要从以下几个方面考虑：
【一抗的物种来源】
二抗应与所用一抗来自同一物种来源。例如，如果您的一抗是小鼠单克隆抗体，那么二抗应该是抗小鼠二抗（羊抗小鼠或兔抗小鼠等）；如果一抗是用兔血清制备的兔源性多克隆抗体，则相应的二抗需要是抗兔二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的针对该物种的二抗。紫晶可为您提供最全的针对不同物种的进口二抗，包括针对小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等的二抗。
【一抗的类别和亚型】
二抗应与一抗的类别或亚类相匹配。这通常适用于单克隆抗体。多克隆抗体主要是IgG免疫球蛋白，因此相应的二抗是抗IgG抗体。单克隆抗体的类型和亚型通常在产品说明书中描述。如果您的一抗是小鼠 IgM，那么相应的二抗应该是抗小鼠 IgM。如果一抗是小鼠 IgG 的某个亚类（IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3），那么几乎任何抗小鼠 IgG 都会与其结合，或者您可以选择专门针对该亚类的二抗，例如，如果您的一抗是小鼠IgG1，那么您可以选择抗IgG1二抗，特别适合双标实验。如果一抗的物种/亚类不清楚，可以使用针对相应物种的 IgG。紫晶可以为您提供通用的IgG（H+L）二抗，或者只特异性结合IgM的Anti IgM（mu）抗体，Anti IgA（针对IgA的α抗体），Anti IgE（epsilon）针对IgE的抗体等。
【二抗的物种来源】
一般来说，不同物种来源与二抗的质量没有必然关系。一般实验中山羊二抗和驴二抗没有太大区别。但在一些特殊实验中，如双标实验，如果一抗之一来自山羊，另一个来自小鼠，则相应的二抗应分别是抗山羊和抗小鼠。，二抗不能选自山羊或小鼠来源。紫晶有相应的驴源二抗，非常适合类似的双标免疫实验。
[二抗的偶联标记]
一般来说，二抗偶联的探针主要包括酶（辣根过氧化物酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP、PAP）、荧光基团（FITC、罗丹明、德克萨斯红、PE、罗丹明、Dylight等）、生物素，金颗粒。探针二抗的选择主要取决于具体的实验。对于western blot和ELISA，最常用的二抗是酶标二抗；而细胞或组织标记实验（细胞免疫化学、组织免疫化学、流式细胞术）通常使用荧光团标记的二抗，免疫组织化学也可以使用辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶偶联的二抗。如果想更大程度的放大检测信号，可以使用Biotin/Avidin检测系统。在一些荧光检测方案中，需要选择不同的荧光标记；而金颗粒标记的二抗则更常用于免疫电镜。Amethyst 可以为您提供上述所有不同类型的标记二抗。
【二抗是否被血清吸附】
为了减少二抗与样品的非特异性结合，紫晶还可以为您提供不同血清吸附量的进口二抗。如果您的检测样品是人源蛋白，一抗是小鼠源单克隆抗体，二抗需要选择抗小鼠源二抗。如果您对实验的特异性要求较高，那么我们建议您推荐已被人血清吸附的抗鼠源二抗。该二抗排除了因人血清吸附而可能与人源组织发生非特异性反应的IgG（如IgG等），从而减少非特异性结合。到最低限度。
【抗 IgG 或抗 IgG，F(ab')2 片段】
在一些组织如胸腺、脾脏、血液以及造血细胞、淋巴细胞、B细胞等中，通常存在较多的Fc受体。这时，选择二抗时最好选择Anti-IgG，F(ab')2片段特异性二抗，这样可以消除Fc部分与IgG的非特异性结合。常规Anti-IgG(H+L)二抗与IgG的重链和轻链均发生结合反应，即可以与IgG的Fc的F(ab')2片段结合；由于 IgG、IgM 和 IgA 具有保守的轻链结构域，因此 Anti-IgG (H+L) 会与它们发生交叉反应。抗IgG，F(ab')2片段已被IgG Fc片段吸附，因此仅与IgG的F(ab')2片段结合。然而，IgG、IgM和IgA都具有保守的轻链结构域，因此与它们之间也存在交叉反应性。
【抗 IgG (H+L)、抗 IgG (gamma)、抗 IgM (mu)、抗 IgA (alpha)】
在一些特殊实验中，只需检测样本中的IgG或IgM即可。常规Anti-IgG（H+L）与IgG的重链和轻链发生结合反应，而IgG、IgM、IgA均具有保守性，因此无法特异性检测某些类型的IgG或IgM。这时就需要针对特定类型的Ig分子的二抗。Amicate拥有全面的二抗现货产品，可以提供最完整的二抗产品线。
