IVD质量研究，一些共同要求！
体外诊断试剂的质量研究是产品研发的重要内容之一，也是技术审评的关键部分。质量研究成果是制定产品标准的重要依据。同时，部分内容也将纳入使用说明书，帮助检查人员和临床医生正确使用、准确判断检查结果。
诊断试剂产品涉及学科广泛、技术发展迅速、品种多样。不同类型产品的质量研究工作不仅有相同的共同要求，而且还需要根据产品的特点，在某些方面有所侧重。下面我们就本次研究工作中的一些常见问题分享一下自己的看法，以期与开发者进行交流。
一、质量研究工作需要考虑的几个问题
1、定性测定、定量测定、血型产品等不同产品的质量研究内容并不完全相同。开发者应该具体问题具体分析。高质量研究的内容应尽可能全面，包括一般性项目和针对性项目。同时必须采用多批次产品进行质量研究，以提高产品质量研究结果的可靠性。
2. 尽可能使用患者来源的样本或样本池进行质量研究。添加样品或质量控制或标准可以补充质量研究，但不建议使用这些样品作为质量研究的唯一矩阵，因为这些样品可能无法全面评估产品的性能指标。
3、尽可能采用产品使用说明书中向用户推荐的测试方法，包括样品处理（如细胞裂解、提取和离心等）、质量控制和校准程序等进行质量研究，以便以反映产品的预期性能。
4、建议详细解释质量研究方法，以便正确理解质量研究结果。例如，引用NCCLS相关文献时，建议注明引用的文献以及做了哪些修改。
5. 如果在质量研究中使用添加剂样品，建议提供添加剂的详细信息，如纯度、浓度等。
6、如果采用不同类型的样本作为检测对象，如血清、全血等，必须确认不同类型样本的测定结果之间存在较高的相关性。
2.质量研究工作中的方法学验证和检查
方法学验证和检查是各体外诊断试剂质量研究所必须开展的任务。方法学验证和检验工作一般包括：精密度、测量范围、灵敏度、专属性、准确度、与同类产品或其他方法的比较、样品储存和处理条件等。
1. 精度
1.1 建议至少使用三个浓度的样品进行精密度研究。建议选择具有医学决定性的样品浓度。
1.2 为了评价所有检测步骤的精密度，应评估样品前处理方法（如核酸提取等）的影响，即每次重复检测均应单独进行样品前处理。
1.3 建议学习NCCLS EP05-A文件，该文件对实验设计、样本选择、统计方法等进行了详细描述。
2. 面积
2.1 建议在测量范围内至少使用5个浓度样品对测量范围进行研究。样品浓度应均匀分布在试剂盒的整个测量范围内。建议对每个所需浓度的样品分别进行预处理，以评估预处理对测定范围的影响。
2.2 有些免疫试剂具有“HOOK效应”。建议将测量范围研究中使用的浓度范围扩大至临床最高浓度，以评价是否存在HOOK效应。
2.3 如果建议稀释样品超出测定范围，应对稀释方法进行研究和评估。
2.4 建议学习NCCLS EP06-A文件。本文件详细描述了样品制备方案、样品分布、实验方法、统计方法和评价方法。
3. 灵敏度
3.1 灵敏度是指该方法能够检出被测物质的最小量，临床灵敏度是指该方法能够正确检出患病人群的比例。分析敏感性研究需要在质量研究中进行。
3.2 建议对每个检测样品分别进行样品前处理，不仅模拟患者样品的实际实验方法，而且评估样品前处理对检测灵敏度的影响。
3.3 应在检测灵敏度级别评价测量偏差和精密度，以说明检测灵敏度所能满足的精度要求。
3.4 对于定性测定产品，可对高浓度样品进行稀释，并以最高稀释倍数作为检测灵敏度。
3.5 建议研究NCCLS EP17-P文件。
4. 特异性
4.1 分析特异性是指该方法仅测量某种分析物的能力，临床特异性是指该方法能够正确检测到未患病人群的比例。质量研究需要分析特异性研究。
4.2 在分析具体研究时，建议考虑以下几方面的影响因素：
(1)样品中含有可能影响检测特异性的内源性化合物：如血液样品中的胆红素、血酯、血红蛋白等。尿样中的尿糖、尿蛋白等。
(2)与受试物结构相似的化合物：如甲基苯丙胺检测试剂盒，结构类似物包括麻黄碱、苯丙胺、MDEA、MDMA、雷尼替丁、普鲁卡因、盐酸去甲肾上腺素、可待因、芬太尼醇、吗啡等。例如HCG检测试剂盒，结构类似物包括FSH、LH和TSH等。
（3）分类位置或临床感染部位相似的微生物，如丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂盒。分类位置或临床感染部位相似的病毒有CMV、EBV、HIV、HSV、HTLV、HAV、HBV等。
(4)与样品接触的抗凝剂和防腐剂：如EDTA等。
4.3 建议学习NCCLS文件EP07-A。
5. 准确性
对于定量计量产品，可以采用国际或国家标准计量、加回收率试验等方法来评价产品的计量精度。
6、与同类产品或其他方法的对比试验
6.1 质量研究阶段进行的对比试验是研发单位内部进行的小样本临床研究。结果是产品能否用于真正的大样本临床研究的重要依据。因此，对比试验方法的科学性和规范性是试验结果科学可靠的基础和保证，也是该产品临床研究成功的重要基础。
6.2 质量研究阶段进行的对比试验更注重试验的策划：强调对所用对比试剂（对比方法）和待测样品的充分了解。强调样本分配的合理性，因为不同组样本的比较测试结果可能会导致不同的测试结论。以定量测量产品为例，应了解对比试剂的方法学、临床使用目的和范围、主要质量指标，如检测灵敏度、定量测量范围、测量精度、标准品（校准品）的溯源性、以及推荐的参考资料。待测样本应尽可能包含日常工作中可能遇到的各种样本，如疾病样本、相关疾病样本、溶血样本、脂血症样本、黄疸样本等，被测物质的浓度应在测量范围内均匀分布。应充分了解受检患者的详细临床信息，以便对检测结果进行综合分析。
6.3 对于产品的定量测定，建议研究NCCLS文件EP09-A2。对于定性测量产品，在实验设计、样本选择原则等方面也可参考上述文件。
7. 样品储存和处理条件
建议研究说明书推荐的样品储存时间、条件等，包括温度和允许的冷冻/解冻循环次数，以建立可接受的样品储存和处理条件标准。
不同类型的产品需要研究人员根据其特点进行有针对性的研究。建议开发者加强对NCCLS系列指导文件的学习。目前，一些申办者已采用NCCLS文件中推荐的方法进行质量研究，并将其研究结果纳入使用说明书中。
