筛选原材料占70%，你信吗？
根据《体外诊断试剂分析性能评价指导原则●，主要分析性能评价项目有：检出限、线性范围、报告范围、准确度（回收率实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验，稳定性，参考值。目前国际上通常以美国临床实验室标准化研究所（CLSI）的相关标准为依据。
产品性能评价是产品研发、产品标准制定等过程的重要技术支撑研究过程，可能对产品质量产生一定影响。整个研发过程涉及原材料、工艺和理念。由于行业正处于发展的黄金阶段，整个研发流程很少受到重视和优化。如果不理顺三者之间的关系，整个研发过程就会陷入盲目性和不可持续。
当你刚开始研发时，通常使用现有的系统，包括稳定的配方系统（包被缓冲液、封闭缓冲液、酶标缓冲液、校准液稀释液、发光底物溶液）和工艺流程，一切都准备好了按原理，使用现有配方，遵循现有流程，按流程操作。大部分工作用于筛选匹配、分析数据。
这个进入阶段一般至少持续2-3年，因为配方体系和工艺体系（以下简称工艺，包括配方和体系）是前人通过大量研究成果建立起来的，一般都比较稳定和稳定。很少修改（即使需要改进，权限也在研发总监手里），整个研发思路已经精简，所以不需要考虑太多。很多新技术人员，经过这次配对筛选后，就会从一定数量的配对中选出更合适的配对，进行下一步的研发。很容易得出结论，套件的质量基本上取决于原材料的质量。如果没有选好原材料，或者遇到困难的项目，就无从下手。
我们对原材料、工艺、思路进行详细拆解分析，目的是明确绩效评价项目中哪些项目是由原材料决定的，哪些项目是由工艺决定的，哪些项目是两者共同影响的，从而推动研发思路的形成和成熟发展，希望能够抛砖引玉。
NO.1原料
我们提取免疫试剂中的关键原材料，分为抗原抗体和特殊成分两部分。
1. 抗原和抗体
免疫试剂一般可分为两个过程：免疫反应和显色反应。免疫反应是核心，而分析物从复杂样品中的特异性分离，这个环节的质量直接决定了整个试剂的核心质量。
工业生产中，通常通过工程菌表达抗原片段，免疫动物，制备多克隆或单克隆抗体，然后将获得的抗体进行配对和筛选，选择合适的配对用于免疫测定。在这个过程中，由于待测抗原一般为天然抗原（少数科研检测重组抗原），而抗体的制备和筛选一般采用重组抗原，这会带来很多应用问题。对于抗体生产企业来说，值得关注。
2.特殊成分
作为脆弱的非共价键合过程，免疫反应会受到时间、干扰物、桥接、结构类似物等的影响。为了消除这些不利影响，一般会在缓冲系统中添加一些特殊成分。我们将特殊成分定义为次要原材料，并在流程中详细说明。
不。2 工艺
工艺包括配方体系和工艺流程，二者相辅相成。所有配方和工艺均旨在确保和提高产品性能。当原材料不能满足产品性能要求时，如何通过配方技术来改进，或者说哪些性能可以通过配方技术来改进，如何改进，这只能由原材料来决定，必须不断积累和在我们的研发生涯中得到了改进。
1、配方体系
配方系统可拆解为缓冲系统和改良系统。
(1)缓冲系统一般的缓冲系统可以在教科书、产品说明书、论文中看到。主要包括离子对类型、离子浓度、pH值等，非保密公式比较容易理解和掌握。
(2)改进的系统由于免疫反应非共价键的脆弱性，依靠简单的缓冲系统很难获得良好的反应结果。为了解决这个问题，科学家们设计了各种改进的系统。在这些系统下，有多种生产方法。
A.减少后台系统
A。使用适当的包衣和标记浓度，一般通过棋盘滴定法确定。
b. 添加可提高溶解速率并减少非特异性吸附的物质，例如 Triton 和 Tween。
B. 减少干扰系统
A。添加正常小鼠血清或小鼠IgG，以减少人抗小鼠抗体的影响
b.添加封闭剂，减少类风湿因子的干扰
C. 减少前带效应系统
A。考虑到背景，适当增加包被和标记的浓度
b.添加检测抗体和裸抗体，考虑灵敏度
D.增加灵敏度系统
A。添加 Triton、Tween 等。
b.添加特殊物质，如S19
E. 完善检出率体系
A。多种抗体的联合使用，如CnTI项目
F. 完善稳定性系统
A。向缓冲液中添加保护性蛋白质、糖和小分子化合物
G.其他系统等。随着研究的深入，这个目录会不断增加，相应的方法也会不断增加。
2、工艺流程
工艺流程还包括生产工艺流程和试剂盒检测操作工艺流程两个方面。
(1)生产工艺生产工艺对产品的整体性能影响很大，如预涂板的制备工艺，涂布、密封、干燥的温度和时间对整个性能影响很大，需要研发摸索。
（2）检测操作流程 与生产流程相比，试剂盒的检测操作流程对性能影响较大，一步法、两步法、样品量、加样顺序、孵育温度、孵育时间。
NO.3 思路
我们对原材料和工艺进行分析，寻找合适的研发思路，指导研发流程，提高研发效率。整个研发思路分为两个问题：产品研发和改进研发。
1、产品开发
产品研发是一个从无到有的过程，大部分都是根据市场上现有的试剂来开发公司没有的产品。这个过程占了研发的大头，我们把它细分为三个过程：前期研发、临床前试验、稳定性测试。对于所有的研发来说，我们必须知道如何评价一个绩效项目，哪些因素会影响这个绩效，以及如何改进。我们以双抗体夹心为例。
（一）前期研发 前期研发一般强调三种活性成分：包被抗体、检测抗体、校准品。包被抗体和检测抗体将具有经验浓度。校准品一般采用合适的基质对抗原或高值样品进行梯度稀释，得到的梯度浓度由第三方指定，可追溯到国际、国家或企业标准。
初期研发大多是做pair筛选，只需要利用检测限、线性范围、可报告范围三个性能评价项目来筛选出候选pair。例如，如果您获得 10 株抗体，您可以制作 100 对，对其进行筛选，并选择一些最初可用的候选对。
对初筛的候选对进行精密度、准确度（回收率试验）、干扰试验评价，并通过这些实验对候选对进行再次筛选。
（2）临床前实验 不涉及临床血清样本的初步研发完成后，得到一定的候选配对，进行临床前实验，主要评估准确性（方法学比较）和参考值范围。
（3）稳定性测试通过以上两步，试剂盒初步形成，还需要对活性成分（包括预包被板、校准品、酶标抗体）的稳定性进行一一评估和完善，直至满足要求。
2. 改进研发
整个试剂盒的开发最终是为了检测临床血清样本，所有分析性能评价项目也是为此目的而设计的。血清样本量非常有限，最多可以完成小规模试制。当真正的产品推出并临床应用时，随着样本量的扩大，很多以前没有暴露出来的问题将会集中暴露出来，必须收集足够的数据来改进研发。
一般来说，在这个阶段，对于不符合临床要求的样本，特别是假阳性和假阴性样本，需要将样本与不同厂家的试剂进行比对，分析成分等。这个过程会在预检和预检中进行。临床和正式临床试验。在临床和正式临床试验中，应当对检测值存在严重差异但未导致假阳性或假阴性的样本进行分析。
