还在为恒温扩增技术的疑惑而苦恼吗？不要被抛在后面！
核酸检测是病原体检测的金标准，而qPCR是最常用的核酸检测方法。然而大规模筛查对检测时间提出了新的要求。与PCR相比，恒温扩增技术不需要温度变化，在扩增效率和设备要求方面具有明显优势。
面对成熟的传统技术，不少研究人员担心恒温扩增技术的检测限灵敏度受到质疑，处于观望状态。不过，目前已有多家企业使用安普未来生物的多酶恒温快速核酸扩增技术MIRA，并获得三类医疗器械注册证，恒温扩增市场日益扩大。
CRISPR检测技术的市场应用前景良好，因为它不仅可以检测各种病原体，而且在基因突变和位点突变的检测方面也发挥着巨大的作用。其优点突出，更容易与RPA、MIRA等恒温检测技术结合。不仅可以提高特异性，而且可以充分发挥恒温技术的独特优势。检测时间短、响应快、灵敏度高。所需检测设备少，可降低检测成本。
中国人民解放军疾病预防控制中心宋洪斌主任课题组在《基于便携式CRISPR-Cas13a的侧向层析检测技术高度灵敏、快速检测SARS-CoV-2●文章发表期刊《JOURNAL OF MEDICAL VIROLOGY●，影响因子20.693。
文章中使用的关键技术是MIRA和CRISPR，经过巧妙设计，实现了双靶点试纸检测
研究中采用了恒温扩增技术MIRA结合CRISPR免疫层析双重检测。人内参基因的检测由内参控制，保证样本采集、保存、转移、核酸提取的有效性。
MIRA结合CRISPR免疫层析双重检测方法的检测限及特异性评价：
检测限：0.25copies/uL，与其他8种人类冠状病毒无交叉反应，检测特异性良好。
MIRA结合CRISPR荧光检测方法的检测限及特异性评价：
检测限：0.25copies/uL，与其他8种人类冠状病毒无交叉反应，检测特异性良好。
由于该方法灵敏度高，可能有助于对感染者进行早期筛查。该研究为MIRA结合CRISPR检测提供了强大的可视化工具，可显着提高SARS-CoV-2现场检测的可靠性，作为临床检测具有巨大的应用价值。
高灵敏度：基于MIRA扩增技术建立的CRISPR-LFA方法显示LoD为0.25拷贝/μl，检测限突破了我国销售的病原核酸检测试剂盒1拷贝/μl的LoD极限，与 RT-PCR 方法相当。
快速高效：CRISPR免疫层析可在1小时内报告检测结果，因此与RT-PCR相比，可节省30分钟至1小时；
检测成本低：CRISPR免疫层析方法需要最少的仪器，可提供37-42℃的恒温°C、节省与昂贵仪器相关的成本。
在病毒、真菌、细菌、微生物等检测中，通过等温扩增技术对目标核酸进行富集，扩增产物与Cas蛋白结合，激活Cas蛋白切割报告探针，放大检测信号。由于这个特点，很多科研老师对这种研究方法非常感兴趣。
AMP未来生物与海洋微生物将于7月25日星期二20:00推出线上直播——“恒温扩增与CRISPR组合的技术应用与分享”。直播将重点介绍多酶恒温核酸扩增技术MIRA和CRISPR-Cas12a、cas13a，从应用场景、技术原理，以及如何将两种技术与引物设计、系统制备、科研结合起来文章案例（HPV多靶点分型检测、胶体金试纸式现场快速检测应用等），为科研老师提供详细介绍。
