IVD响应曲线“取点”的方法有哪些？
1. 终点法
根据反应产物的吸收光谱特征及其反应达到平衡时的吸光度来定量分析物质的方法。对于一般化学反应来说，反应终点是指反应完全（或正逆反应动态平衡）且反应产物稳定时。对于抗原抗体反应来说，终点是抗原和抗体完全反应并形成最大且稳定的免疫复合物。反应时程曲线上有一条与X轴平行的线段。从测量和计算方法来看，一般有一点法和两点法两种。
1、一点法（ONE POINT）以试剂与样品混合前的空气空白（GB）、水空白（WB）或试剂空白（RB）的吸光度值作为测定计算基点，减去空白从反应结束时的吸光度读数中读取以获得反应吸光度。测定结果是在相同条件下将吸光度与校准溶液的反应吸光度进行比较而得到的。它常与一点校准法结合使用，即使用一个校准浓度，校准曲线经过零点并变为线性。还应用多点校准。
2、两点终点法（TWO POINT END），即终点-起点法，以试剂与样品混合后的某一时间点为起点，从读数中减去起点读数反应终点时的吸光度读数。在一定条件下，可以降低样品对反应或反应本身的特异性和干扰（主要指色度干扰）。常采用双试剂，常以加入R2之前的点作为测定起点；在某些情况下，也可以添加R2后的点作为判断的起点。如果使用单一试剂，当主反应开始太快或仪器初始读数点有限时，很难使用。
固定时间法（FIXED METHOD）与两点终点法的唯一区别是测量读数的终点不在反应平衡段，而是根据方法学选择。如血清肌酐（苦味酸法）测定。
3、三点终点法即双终点法，在一个通道中同时测量两个与反应相关的终点。例如，它还可以测量游离脂肪酸和甘油三酯。某些仪器（如HITACHI系列）设置此方法。
2. 持续监测方法
又称速率法（RATE ASSAY）。即连续监测反应过程并根据测得的产物形成速率或底物消耗进行定量分析的方法。反应时程曲线是反应呈现恒定速度（斜率保持不变）的一段，常用于确定酶活性的线性反应周期。
1、连续监测方法是零级反应速率法，又称斜率法。在较长的反应时间段内（至少90-120秒），读取某一时间（一般为2～30秒）的吸光度值，至少读取4个点，得3个点；一般情况下，连续多次读数采用最小二乘法处理。如果读数间隔太短，则采用速率时间（TR）多点法。将线性反应部分的读数全部取出来计算单位时间的反应速率ΔA/MIN。该方法必须以零级反应作为测量和计算的基础，因为只有在零级反应下，单位时间的吸光度变化（反应速率Δ/MIN）才与酶活力成正比。该方法相对减少了分析误差，大大提高了分析速度和准确性。但半自动生化分析仪采用的是单样本连续监测，相当耗时。应用连续监测方法，首先应在线性范围内制备高、中、低浓度样品，分别制作反应时间过程曲线，以了解不同浓度下的整个反应过程，同时考虑延迟时间和反应时间的确定。线性监测周期。
2、两点速率法就是所谓的伪一阶速率法。选取反应中两个时间点T 1 和T 2 ，读取吸光度A 1 和A2，并计算(A2-A1)，(T2-T1)=鈻矨，鈻砊。该方法与两点终点法有两个主要区别：后一个读数点的反应没有达到终点，结果是根据速率计算的。与连续监测方法相比，其缺点是T 1 和T 2 是人工确定的，不确定因素较多。不能保证T 1 到T 2 期间反应呈线性，影响结果的准确性；常规测量前应进行预测试。以确定线性时间段。如果在选定的时间段内反应不是线性的（例如零级反应周期短，仪器无法设置或测量），则只能用终点法代替。优点是方法简单；当酶活性较低、测得的吸光度值较小时，可以增加测量时间段，不受仪器连续监测时间点的限制，从而减少读数误差。
3、速率B方法在一个通道中同时执行两个与反应相关的速率方法测量。它可以用于两次测试测量，也可以用于干扰或/和样品空白的自动补偿。后者的使用原理是：利用仪器的微机进行自动处理，在第一个反应（干扰反应）始终保持线性的前提下，可以从第二个反应的速率中减去第一个反应速率的残留效应。反应（初级反应）。例如用于消除胆红素转化为胆绿素时吸光度的下降，肌酐苦味酸法测定中的负面干扰等。有些仪器（如HITACHI系列）设置了此方法。
3. 空白修正
在分光光度法中，空白溶液常用于调整仪器的吸光度零点，或抵消某些测量中的干扰因素。在生化分析仪测量中，除了采用双或多波长、两点法等消除背景干扰外，还常采用特殊的空白测量，从所测样品的吸光度中扣除其影响。正确选择空白校正对于提高精度具有重要作用。
1. 试剂空白一般分为两类：方法类型和校准模式中带或不带试剂空白。试剂空白单独测量或与校准结合测量，需要预先选择去离子水样品杯或试剂空白架。校准或患者样本的每个测量点的吸光度必须从相应测量点的试剂空白吸光度或空白率值中扣除。对于没有试剂空白的方法，常使用反应杯中的水空白作为测量参考值。
在许多仪器中，试剂空白测量与校准测量类似，并且在测量患者样本时不是实时测量的。因此，应注意其测定频率，避免因试剂批号或质量变化而导致试剂空白变化而导致计算误差。
2、样品空白主要是消除样品本身浊度或色度的干扰。常采用空白通道法，测量校准结果=显色反应通道结果-空白通道结果。大多数仪器必须占用额外的测量通道，分析速度减半，但干扰去除的精度应高于两个端点。
